Морфология простейших. Простейшие — Protozoa Морфологические особенности и структура жгутиковых простейших

Тема : Морфология простейших.

Цель: Изучение морфологии патогенных простейших в препаратах из патологического материала.

Модуль 1.

Тема 6: Морфология и структура бактерий, спирохет, актиномицет, грибов и простейших.

Актуальность темы. Простейшие (Protozoa) это эукариотические одноклеточные организмы, имеющие микроскопические размеры. Патогенные для человека простейшие принадлежат к разным классам: саркодовые (дизентерийная амеба), жгутиковые (лейшмании, лямблии, трихомонады, трипаносомы), споровики (токсоплазма, малярийные плазмодии), реснитчатые (балантидии).

Простейшие широко распространены в природе. Это связано со способностью простейших к быстрому размножению, их маленькими размерами, а также тем, что в неблагоприятных условиях большинство из них образует цисты, которые способны переносить изменения температуры, влажности и др. Для простейших характерен сложный жизненный цикл, иногда со сменой хозяина, как, например, у возбудителя малярии (комар-человек) или токсоплазмоза (кошка-человек).

Простейшие имеют органы движения (жгутики, реснички, псевдоподии), питания (вакуоли), и также у них возможно питание путем фагоцитоза. Размножаются они несколькими путями: простым и множественным делением, половым путем, образованием цист. Поверхность тела простейших покрыта клеточной мембраной. У большинства из них есть внешняя эластическая оболочка пелликула, выполняющая защитную функцию. Для проникновения в клетку хозяина у простейших имеются специальные приспособления, например у токсоплазм сложный комплекс органелл коноид с фибриллами, трихомонады и лямблии имеют специальные присоски.

Для выявления простейших используется микроскопия нативных и окрашенных препаратов из исследуемого материала с применением иммерсионного, фазово-контрастного или люминесцентного микроскопов. Для изучения ультраструктуры используется электронная микроскопия.

Конкретные цели:

Ознакомиться с классификацией патогенных простейших.
Разобрать и изучить схемы жизненных циклов патогенных простейших.
Научиться трактовать морфологические признаки каждого вида.
Сделать выводы о морфологических формах простейших.
Научиться трактовать и анализировать результаты микроскопического исследования патогенных простейших.

Уметь:

Проводить микроскопию препаратов патогенных простейших, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
Анализировать морфологические признаки патогенных простейших.

Теоретические вопросы:

Классификация простейших.
Структура клеток простейших (эукариотов).
Сравнительная характеристика клеточного строения прокариотов и эукариотов.
Методы окраски простейших.
Возможность исследования нативных препаратов для диагностики протозойных инфекций.
Приоритет отечественных ученых в изучении некоторых протозойных инфекций. Работы В.А. Леша, Е.И. Марциновского, П.Ф. Боровского.

Микроскопия демонстрационных препаратов патогенных простейших, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
Зарисовка демонстрационных препаратов и схем жизненных циклов патогенных простейших в протокол.
Оформление протокола.

Литература:

1. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология / Учебник для медицинских ВУЗов, СанктПетербург «Специальная литература», 1998.592 с.

2.Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник. 2-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1983, - 512с.

3. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією. Київ: Вища школа, 1992. 431с.

4.Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского. М.:ГЕОТАР-МЕД,2001.-768с.

5. Циганенко А.Я., Павленко Н.В. Мікробіологія, вірусологія та імунологія /Керівництво до практичних занять для студентів медичних та фармацевтичних ВУЗів, Харків, ХДМУ, 1996. 272с.

5. Конспект лекции.

Дополнительная литература:

1. Казанцев А.П. Токсоплазмоз. - М.: Медицина, 1985. - 168 с.

2. Епiдемiологiя. / За ред. Синяк К.М. - К.: Здоров я, 1993. - 460с.

3. Иммунология инфекционного процесса. / Под ред. Покровского В.И., Гордиенко С.П., Литвинова В.И. - М.: Медицина, 1993. - 305 с.

4. Лобан К.М., Полозок Е.С. Малярия. М.: Медицина, 1983. - 224с.

Самостоятельная работа состоит из изучения классификации простейших, разбора схем жизненных циклов простейших, патогенных для человека. Затем студенты изучают демонстрационные препараты и зарисовывают их в протокол занятия.

п/п	Этапы	Время в мин	Способы обучения	Оснащение	Место прове дения
				Таблицы, атлас	Учеб ная комна та
	Самостоятельная работа		Граф логической структуры	Иммерсионный микроскоп, препараты патогенных простейших, окрашенны е по Романовскому-Гимзе
			Целевые обучающие задания
	Тестовый контроль		Тесты
	Анализ результатов работы

Целевые обучающие задания к теме «МОРФОЛОГИЯ ПРОСТЕЙШИХ»:

1. У беременной в мазках крови при микроскопии были обнаружены токсоплазмы. Какие из перечисленных ниже морфологических признаков имеет этот возбудитель в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе?

2. У больного с жалобами на частый жидкий стул и схваткообразными болями в животе в баклаборатории была выделена Entamoeba histolytica

B. Удлиненные клетки с 1 жгутиком, 1 ядром и ундулирующей мембраной.

D. Крупные клетки с 1 ядром, псевдоподиями и поглощенными эритроци-тами.

3. В клинику поступил больной, которому был поставлен предваритель-ный диагноз: малярия, вызванная P.ovale. Какие из перечисленных ниже морфологических признаков имеет этот возбудитель в стадии кольца в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе?

A. В увеличенных эритроцитахкольцевидные трофозоиты и зерна Шюфф-нера

B. В увеличенных овальных эритроцитахвакуоли, окаймленные голубой ци-топлазмой с рубиновыми крупными ядрами и крупные зерна Джеймса.

E. Клетки в форме полумесяца с 1 рубиновым ядром и голубой цитоплазмой.

4. К врачу обратился мужчина 35 лет с мокнущей язвой на правой ноге. Известно, что пациент 2 недели назад вернулся из Африки. При микроскопическом исследовании мазков из отделяемого язвы, окрашенных по Романовскому-Гимзе, обнаружили внутриклеточно расположенные мелкие клетки овальной формы без жгутиков с серовато-голубой цитоплазмой и красно-фиолетовым ядром. Для какого из перечисленных ниже простейших характерна такая морфологическая форма?

А . Plasmodium malariae

В . Leishmania tropica

С . Toxoplasma gondii

D. Trichomonas vaginalis

E. Giardia lamblia

5. При микроскопическом исследовании свежих испражнений больного с жалобами на жидкий стул, вздутие живота, потерю аппетита были обнаружены клетки грушевидной формы с симметрично расположенными 2 ядрами, 2 базальными тельцами, 2 парабазальными тельцами, 2 нитями аксостиля и 4 парами жгутиков. Для какого из перечисленных ниже простейших характерна такая морфологическая форма?

А . Plasmodium malariae

В . Leishmania tropica

С . Toxoplasma gondii

D. Trichomonas vaginalis

E. Giardia lamblia

6. К врачу-инфекционисту обратился пациент с жалобами на сонливость, утомляемость, истощение, лихорадку. Известно, что он недавно был в командировке в Африке. При микроскопии мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе, обнаружены клетки удлиненной формы с 1 центральным ядром, 1 жгутиком, отходящим от задней части клетки, и резко выраженной ундулирующей мембраной. Для какого из перечисленных ниже простейших характерна такая морфологическая форма?

А . Trypanosoma brucei

В . Leishmania tropica

С . Toxoplasma gondii

D. Trichomonas vaginalis

E. Giardia lamblia

7. У больного с жалобами на жидкий стул, вздутие живота, потерю аппетита в баклаборатории была выделена Giardia lamblia . Какая из перечисленных ниже морфологических форм характерна для этого возбудителя в мазках из свежих испражнений?

A. Округлые клетки с 1 ядром и кинетопластом.

B. Удлиненные клетки с 1 жгутиком, 1 ядром и ундулирующей мембраной.

C. Клетки грушевидной формы с 2 ядрами и 4 парами жгутиков.

E. Клетки в форме полумесяца с 1 ядром.

8. У больной с клиникой вагинита в баклаборатории при микроскопии были обнаружены трихомонады. Какие из перечисленных ниже морфологи-ческих признаков имеет этот возбудитель в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе?

A. Округлые клетки с рубиновым ядром, голубой цитоплазмой, красными 5 жгутиками и аксостилем, и ундулирующей мембраной.

B. Удлиненные клетки с 1 жгутиком, 1 ядром и ундулирующей мембраной.

C. Клетки грушевидной формы с 2 ядрами и 4 парами жгутиков.

D. Крупные клетки с 1 ядром, псевдоподиями и проглоченными эритроци-тами.

E. Клетки в форме полумесяца с 1 ядром.

9. В клинику поступил больной, которому был поставлен предваритель-ный диагноз: малярия, вызванная P.vivax. Какие из перечисленных ниже морфологических признаков имеет этот возбудитель в стадии кольца в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе?

A. В увеличенных эритроцитах крупные центральные вакуоли, окаймленные голубой цитоплазмой с рубиново красными ядрами, и зерна Шюффнера.

B. В увеличенных овальных эритроцитах кольцевидные крупноядерные тро-фозоит и крупные зерна Джеймса.

C. В эритроцитах по 2-3 мелких трофозоита и единичные крупные розово-фиолетовые пятна Мауэра.

D. В лентовидных эритроцитах по 1 кольцевидному трофозоиту.

E. Клетки в форме полумесяца с 1 рубиновым ядром и голубой цитоплазмой.

10. У больного с жалобами на сонливость, утомляемость, истощение, лихорадку, который недавно был в командировке в Африке, в баклаборатории была выделена Trypanosoma brucei . Какая из перечисленных ниже морфологических форм характерна для этого возбудителя в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе?

A. Округлые клетки с 1 ядром и кинетопластом.

B. Удлиненные клетки с 1 жгутиком, 1 ядром и ундулирующей мембраной.

C. Клетки грушевидной формы с 2 ядрами и 8 жгутиками.

D. Крупные клетки с 1 ядром, псевдоподиями и проглоченными эритроци-тами.

E. Клетки в форме полумесяца с 1 ядром.

Ознакомление с классификацией простейших.
Изучение морфологии простейших по схемам, таблицам и демонстра-ционным препаратам.
Разбор схемы жизненного цикла малярийных плазмодиев.
Разбор схемы жизненного цикла трипаносом, лейшманий, лямблий, три-хомонад, токсоплазм.
Микроскопия и анализ демонстрационных препаратов простейших.
Зарисовка демонстрационных препаратов и схем жизненных циклов простейших.
Оформление протокола.

Граф логической структуры темы: «МОРФОЛОГИЯ ПРОСТЕЙШИХ»

Тип

Методические указания для студентов к практическому занятию № 7

Тема:

Цель: Изучить морфологию и методы выявления риккетсий, хламидий и микоплазм.

Модуль 1: Морфология и физиология микроорганизмов.

Тема 7: Морфология риккетсий, хламидий и микоплазм.

Актуальность темы. На территории стран СНГ наблюдаются следующие риккетсиозы: сыпной тиф (в том числе болезнь Бриля), крысиный тиф, марсельская лихорадка, клещевой сыпной тиф Северной Азии, везикулёзный риккетсиоз, Ку-лихорадка, лихорадка цуцугамуши, волынская лихорадка. Имеются активно действующие природные очаги везикулёзного риккетсиоза, марсельской лихорадки, лихорадки цуцугамуши и клещевого сыпного тифа Северной Азии.

Эпидемический сыпной тиф это остропротекающая системная инфекция с тяжелой интоксикацией, при быстром эпидемическом распространении дающая до 30% летальных исходов.

Лабораторная диагностика многих риккетсиозов основывается на выделении возбудителя из крови больных. В этой связи необходимо знать морфологию риккетсий и методы их окраски для распознания их под микроскопом.

Название этой группе микроорганизмов дал в 1916г. Роха-Лима, предложивший назвать возбудителя сыпного тифа Rickettsia prowazekii в честь двух учёных: американского Г.Т. Риккетса и чешского С. Прова-чека, которые первыми его обнаружили (Г.Т. Риккетс в 1909г., С. Провачек в 1913г.) при изучении сыпного тифа и, заразившись погибли от него.

Семейство Ricrttsiaceae состоит из трёх триб: Rickettsiaceae , Ehrlichiae , Wolbachieae . Триба Rickettsiaceae делится на 4 рода: Rickettsia , Rochalimaea , Coxiella , Ehrlichia .

Хламидии уникальная группа мелких патогенных грамотрицательных неподвижных бактерий, являющихся возбудителями различных болезней, человека и животных. У людей они вызывают заболевания глаз, мочеполовой и дыхательной систем. Ежегодно трахомой болеют от 400до 500 млн. человек, из них свыше 10 млн. становятся слепыми. Уретритами хламидийной этиологии страдают до 6% мужчин; 10-12% женщин детородного возраста, у 50% которых при родах происходит инфицирование ребёнка и развивается офтальмия и пневмония новорожденных.

Хламидии облигатные внутриклеточные организмы прокариотной системы. Имеют сферическую форму, РНК и ДНК, рибосомы, клеточные стенки по строению сходны со стенками грамотрицательных бактерий, но лишены пептидогликанов; хорошо красятся по Романовскому-Гимзе.

Хламидии размножаются бинарным делением только в цитоплазме эукариотных клеток по уникальному циклу развития.

Жизненный цикл хламидий представлен двумя основными формами, сменяющими друг друга ретикулярные тельца (вегетативная форма) и элементарные тельца (спороподобные формы).

Элементарные тельца (ЭТ) - инфекционная внеклеточная форма. Они обеспечивают передачу заболевания от человека (животного) к человеку. Ретикулярное тельце (РТ) внутриклеточная форма, развивается из ЭТ попавшего в цитоплазму. После образования РТ хламидийная клетка бинарно делится, образуются тельца включения в виде вакуолей в цитоплазме. Тельца включения прилегают к ядру клетки и их можно выявить в иммерсионном микроскопе при окраске, что используется для диагностики хламидиозов.

Для человека патогенны следующие представители рода Chlamydia : C . trachomatis , C . psittaci , C . pneumoniae .

Классификация хламидий:

Семейство Chlamydiaceae

род Chlamydia род Chlamydophila

C.trachomatis C.pneumoniae

C.suis C.pecorum

C.muridarum C.psittaci

C.abortus

C.caviae

C . felis

Бактериологическая диагностика хламидиозов состоит из предвари-тельного микроскопического исследования материала с целью обнаружения хламидий в инфицированных клетках, окрашенных по Романовскому-Гимзе.

Многие виды микоплазм патогенны для человека, и вызывают поражения дыхательных путей, суставов, сердца, мочеполовой и нервной систем.

30-60% уретритов негонококковой этиологии вызваны M . hominis . Существует мнение, что уреаплазменная инфекция может быть причиной как женского так и мужского бесплодия. Кроме того, M . hominis при внутриутробном заражении плода может быть причиной врождённых аномалий развития ребёнка в связи с её способностью воздействовать на хромосомы клетки.

Лабораторная диагностика не играет решающей роли в распознавании микоплазменной пневмонии. Широко используется выделение чистой культуры возбудителя с последующей идентификацией на основании морфологических, культуральных и др. признаков.

Микоплазмы свободноживущие прокариоты, не имеющие истинной клеточной стенки и не способны синтезировать её компоненты. Функции клеточной стенки выполняет трёхслойная цитоплазматическая мембрана. Большинство видов представлены мелкими клетками, характеризующимися выраженным плеоморфизмом, могут образовывать кокковидные, ветвящиеся и более крупные многоядерные формы способные образовывать псевдомицелий. Окрашиваются по Романовскому-Гимзе.

От человека выделяют представителей рода Mycoplasma , Ureaplasma включающих патогенные и сапрофитные виды.

Классификация микоплазм:

Семейство Mycoplasmaceae

род Mycoplasma род Ureaplasma

M.buccale Ureaplasma urealyticum

M.fermentans

M.hominis

M.pneumoniae

M.genitalium

M.orale

M.salivarum

Для человека патогенны M.pneumoniae, M.hominis, Ureaplasma urealyticum.

Конкретные цели:

Уметь:

Описывать окрашенные микропрепараты приготовленные из мико-плазм.
Микроскопировать, описывать и трактовать окрашенные микропрепа-раты приготовленные из материала, где содержатся риккетсии, цито-плазматические включения хламидий.
Анализировать результаты микроскопического исследования материа-ла, где содержатся риккетсии, хламидии, микоплазмы.

Теоретические вопросы:

Таксономия риккетсий.
Морфология риккетсий, их классификация по форме.
Методы окраски риккетсий
Представители риккетсий, патогенные для человека.
Таксономия хламидий, их классификация, патогенные представители.
Биологическая особенность хламидий. Основные стадии жизненного цикла хламидий.
Морфология хламидий, ретикулярные тельца, элементарные тельца.
Методы обнаружения цитоплазматических включений хламидий. Практическое использование телец-включений.
Таксономия микоплазм. Классификация, патогенные представители.
Ультраструктура и морфология микоплазм.
Методы окраски микоплазм.
Представители микоплазм патогенные для человека.

Практическая работа, которая выполняется на занятии:

Микроскопировать демонстрационный препарат, приготовленный из чистой культуры микоплазм и окрашенный по Романовскому-Гимзе.
Микроскопировать окрашенные по Здродовскому и Романовскому-Гимзе мазки из материала, содержащего риккетсии.
Микроскопировать мазок, приготовленный из соскоба уретры и окрашенный по Романовскому-Гимзе, с целью обнаружения включений в цитоплазме клеток эпителия уретры.
Зарисовать демонстрационные препараты в протокол.
Зарисовать в протокол жизненного цикла хламидий.
Оформить протокол.

Литература:

Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. Санкт-Петербург «Специальная литература», 1998.-579с.
Воробьёв А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбаков А.М. Микро-биология.- М.: Медицина, 1998.- 336с.
Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского.- М.: ГЕОТАФ-МЕД, 2001.- 768с.
Конспект лекции.

Краткие методические указания для работы на практических занятиях.

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов по данной теме.

Самостоятельная работа состоит из изучения морфологии и ультраструктуры риккетсий, хламидий и микоплазм по цветным таблицам.

Студенты просматривают окрашенные демонстрационные препараты в иммерсионном микроскопе, зарисовывают их в протокол, указывая латинское название микроорганизма и метод окраски.

В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ самостоя-тельной работы каждого студента.

Технологическая карта проведения практического занятия:

пп	Этапы	Время в мин.	Средства обучения	Оборудование	Место проведе ния
	Проверка и коррекция исходного уровня подготовки к занятию		Тестовые задания исходного уровня	Таблицы, атлас, рисунки	УЧЕБНАЯ КОМНАТА
	Самостоятельная работа		Графы логической структуры	Иммерсионный микроскоп; микропрепараты из культу-ры микоплазм, окрашен-ных по Романовскому-Гимзе; микропрепарат из материала, содержащего риккетсии, окрашенный по Здродовскому; оксифиль-ные включения элементар-ных телец C . trachomatis в цитоплазме эпителиоцитов уретры. Окраска по Рома-новскому-Гимзе.
	Самопроверка и коррекция усвоенного материала		Целевые учебные задания
	Тестовый контроль		Тесты
	Анализ результа-тов работы

Целевые учебные задания к теме: «МОРФОЛОГИЯ РИККЕТСИЙ, ХЛАМИДИЙ И МИКОПЛАЗМ»

Из плевральной жидкости больного атипичной пневмонией выделен возбудитель, который отличается полиморфизмом, окрашивается по Романовскому-Гимзе. Какой из перечисленных микроорганизмов, вероятнее всего, вызвал атипичную пневмонию.

А . Mycoplasma pneumoniae B. Mycoplasma artrrhitidis

C. Mycoplasma orale D. C.trachomatis

E . Rickettsia prowazekii

2. В кожно-венерологический диспансер поступил больной с диагнозом «негонококковый уретрит». Какой из перечисленных микроорганизмов является возбудителем данного заболевания.

А . Ureaplasma urealyticum B. Mycoplasma pneumoniae

C. Mycoplasma artrrhitidis D. Mycoplasma orale

E . Mycoplasma fermentans

3. В мазке-соскобе из уретры больного при окраске по Романовскому-Гимзе обнаружены включения в виде шапочки вблизи ядра. Какой из перечисленных возбудителей может вызвать подобные образования в клетках призматического эпителия уретры.

C. Chlamydia psittaci D. Ureaplasma urealyticum

E . Trihomonas vaginalis

4. Через 5 дней после купания в бассейне у купальщика обнаружили забо-левание глаз, выражающееся утолщением конъюнктивы и ярко-красной окраской нижнего свода. В мазке, приготовленном из отделяемого конъю-нктивы глаза, обнаружили включения в пораженных клетках. Какой возбудитель вызвал у купальщика конъюнктивит с включениями.

A. Chlamydia trachomatis B. Chlamydia pneumoniae

C . Стафилококк D . Гонококк Е. Аденовирусы

5. У работников зоопарка, ухаживающих за попугаями, возникла атипич-ная пневмония. Какой возбудитель явился причиной данного заболевания.

A. Chlamydia psittaci B. Mycoplasma pneumoniae

C. Chlamydia trachomatis D. Ureaplasma urealyticum

E . Mycoplasma hominis

6. У водителя дальних рейсов врач заподозрил сыпной тиф и взял кровь для лабораторной диагностики сыпного тифа. Как называется возбудитель сыпного тифа.

A. Treponema pallidum B. Borrelia recurrentis

C. Mycoplasma pneumoniae D. Rickettsia prowazekii

E . Coxiella burnetti

В. Спирохеты

С. Микоплазмы

D . Вибрионы

Е. Спириллы

Алгоритм лабораторной работы:

Изучить по таблице морфологию и ультраструктуру риккетсий.
Изучить технику окраски риккетсий по Здродовскому.
Микроскопировать готовые препараты из материала, содержащего риккетсии и окрашенного по Здродовскому.
Изучить по таблице и зарисовать цикл развития хламидий.
Микроскопировать окрашенный по Романовскому-Гимзе мазок-сос-коб из уретры больного с включениями C . trachomatis .
Изучить по таблице структуру микоплазм.
Микроскопировать готовый мазок из культуры микоплазм, окра-шенный по Романовскому-Гимзе.
Проанализировать демонстрационные препараты.
Зарисовать демонстрационные микропрепараты в протокол. Оформить протокол.

Графологічна структура теми "МОРФОЛОГІЯ РИКЕТСІЙ, ХЛАМІДІЙ ТА МИКОПЛАЗМ”

Методические указания для студентов к практическому занятию № 8

Тема: Морфология вирусов человека и бактериофагов.

Цель: Изучение морфологии вирусов человека и бактериофагов.

Модуль 1. Морфология и физиология микроорганизмов.

Содержательный модуль 2. Морфология и структура прокариотов, парази-тических одноклеточных эукариотов и вирусов.

Тема 8: Морфология и структура бактерий, спирохет, актиномицетов, гри-бов, простейших и вирусов.

При помощи электронного микроскопа установлено, что простые вирионы состоят из нуклеиновой кислоты, плотно упакованной в белковую оболочку капсид, имеющий строго упорядоченную структуру. По морфологической структуре нуклеиновая кислота и капсид представляют собой нуклеокапсид, а по химическим свойствам это нуклеопротеиды. У некоторых вирусов (аденовирусы, пикорнавирусы, паповавирусы) нуклеокапсид состоит из капсомеров, представляющих собой скопление полипептидов. Многие сложно организованные вирионы имеют еще и внешнюю оболочку (суперкапсид), в которой содержатся липиды и углеводы клетки хозяина. Суперкапсид оболочка, окружающая нуклеокапсид, имеется у многих вирусов (миксовирусы, герпесвирусы и др.). В зависимости от порядка расположения капсомеров различают вирусы с тремя типами симметрии: спиральным, кубическим, смешанным.

Морфологию и структуру вирусов изучают при помощи электронного микроскопа. Кроме полноценных вирионов встречаются дефектные вирусы и псевдовирионы. Дефектный вирус это вирус, который функционально неполноценный на некоторых этапах репродукции. Псевдовирионы это вирусы, в капсид, которых заключена нуклеиновая кислота клетки хозяина, а не вирусная нуклеиновая кислота.

Бактериофаги это вирусы микробных клеток, которые вызывают их лизис. Лизис бактериальных клеток впервые обнаружил в 1898 г. русский микробиолог Н.Ф.Гамалея. Вирусы, поражающие микроорганизмы, назвали фагами. Фаги различаются по морфологии, типу нуклеиновой кислоты, по химической структуре и характеру взаимодействия с микробной клеткой. Например, фаги кишечной палочки состоят из головки, воротничка, хвостового отростка, базальной пластинки с короткими шипами и хвостовыми нитями. Головка фага, диаметр которой колеблется в пределах 60-90 нм, имеет шестиугольную форму. Внутри головки содержится нуклеиновая кислота, окруженная белковой оболочкой. Хвостовой отросток фага состоит из полого цилиндрического стержня, окруженного сократительным чехольчиком. Хвостовой отросток достигает 250 нм в длину и 30 нм в ширину. Базальная пластинка имеет шестиугольную форму. От нее отходят шесть шипов и шесть хвостовых нитей (фибрилл). Хвостовой отросток обеспечивает прикрепление фага к микробной клетке.

Существуют фаги и другого строения: с длинным отростком и несокращающимся чехольчиком, с коротким отростком и без отростка. Фаги обладают строгой специфичностью и поражают лишь определенные виды микроорганизмов. Различают моновалентные фаги, лизирующие микробные клетки определенного вида, и поливалентные фаги, способные вызвать лизис группы родственных видов микроорганизмов. На основании специфичности фаги широко используются для идентификации микроорганизмов.

Конкретные цели :

Ознакомиться с классификацией вирусов и бактериофагов .
Разобрать и изучить схемы репродукции вирусов и бактериофагов .
Научиться трактовать морфологические признаки каждого семейства вирусов .
Сделать выводы о морфологических признаках вирусов .
Научиться трактовать и анализировать результаты микроскопического исследования ЦПД вирусов .

Уметь:

Проводить микроскопию препаратов с цитопатическим действием виру-сов с помощью иммерсионного микроскопа.
Анализировать морфологические признаки вирусов.

Теоретические вопросы:

Биологические особенности вирусов.
Морфология и ультраструктура вирусов (с указанием специфических тер-минов).
Электронный микроскоп. Принцип работы.
Методы непрямого выявления наличия вирусов в организме.
Методы выявления вирусов в исследуемом материале с использованием иммерсионной люминесцентной микроскопии.
Понятие о люминесцентном микроскопе.

Практические задания, которые выполняются на занятии:

Микроскопия демонстрационных препаратов цитопатического действия вирусов.
Зарисовка демонстрационных препаратов и схем репродукции вирусов в протокол.
Оформление протокола.

Литература:

1. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология /Учебник для медицинских ВУЗов, СанктПетербург «Специальная литература», 1998. 592 с.

2. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник. 2-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1983,- 512с.

3. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імуноло-гією. Київ: Вища школа, 1992. 431с.

4. Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского. М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.-768с.

6. Балаклієць Н.І, Циганенко А.Я., Мінухін В.В. Загальна мікробіологія: Навчальний посібник для студентів мед. і фарм. ВУЗів /За редакцією А.Я. Циганенка. Х.: Основа, 2002. 248 с.

7. Конспект лекции.

Д ополнительная литература :

1. Букринская А.Г., Жданов В.М. Молекулярные основы патогенности вирусов.- М.: Медицина, 1991.- 255 с.

2. Посібник з медичної вірусології /Під редакцією Гиріна В.М.- К.: Здоров"я, 1995.- 368 с.

3. Вирусология в 3-х томах /Под редакцией Филдса Б. и др.- М.: Мир, 1989.- 494 с.

Краткие методические указания к работе на практическом занятии.

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.

Самостоятельная работа состоит из изучения классификации вирусов , разбора схем репликации вирусов и бактериофагов. Затем студенты изучают демонстрационные препараты и зарисовывают их в протокол занятия.

В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ конечных результатов самостоятельной роботы каждого студента.

Технологическая карта проведения практического занятия.

п/п	Этапы	Время в мин	Способы обучения	Оснащение	Место прове дения
	Проверка и коррекция исходного уровня подготовки к занятию		Тестовые задания исходного уровня	Таблицы, атлас , учебны й с тенд по вирусологии	Учеб ная комна та
	Самостоятельная работа		Граф логической структуры	Иммерсионный микроскоп, демонстрацион ные препараты с ЦПД вирусов
	Самостоятельная проверка и коррекция освоения материала		Целевые обучающие задания
	Тестовый контроль		Тесты
	Анализ результатов работы

Целевые обучающие задания к теме «МОРФОЛОГИЯ ВИРУСОВ ЧЕЛОВЕКА ИБАКТЕРИОФАГОВ»:

1. К РНК-содержащим вирусам относятся:

А. Парамиксовирусы

В. Парвовирусы

С. Герпесвирусы

D . Аденовирусы

Е. Поксвирусы

2. Какую форму имеет вирус бешенства?

А. Сферическую

В. Палочковидную

С. Нитевидную

D . Пулевидную

Е. Ланцетовидную

3. Какие из перечисленных вирусов имеют нуклеокапсид со спиральным типом симметрии?

А. Энтеровирусы, вирусы

гепатита А

В. Вирусы бешенства, гриппа,

паротита

С. Аденовирусы, реовирусы

D. Вирусы гепатита А,

клещевого энцефалита

Е. Энтеровирусы, герпесвирусы

4. Какой тип симметрии присущ бактериофагам?

А. Икосаэдрический

В. Бинарный

С. Трапециевидный

D . Ромбовидный

Е. Нитевидный

5. К оболочечным вирусам относят:

А. Ретровирусы

В. Реовирусы

С. Аденовирусы

D . Пикорнавирусы

Е. Парвовирусы

6. Структурная единица нуклеокапсида это:

А. Пепломер

В. Капсомер

С. Изомер

D . М-белок

Е. Липид

7. Чем обусловлен спиральный тип симметрии капсида вирусов?

А. Винтообразной структурой

нуклеокапсида

В. Образованием изометрически

полого тела

С. Изменением структуры капсида

D . Образованием пепломеров

Е. Синтезом белковой оболочки

8. Как называются вирусы, в капсид которых заключена нуклеиновая кислота клетки-хозяина?

А. Псевдовирионы

В. Бактериофаги

С. Дефектные вирусы

D . Поксвирусы

Е. Аденовирусы

Алгоритм лабораторной работы:

Ознакомление с классификацией вирусов и бактериофагов.
Изучение молекулярно-генетической организации и репродукции вирусов и бактериофагов по схемам, таблицам и атласу.
Микроскопия и анализ демонстрационных препаратов с ЦПД вирусов.
Зарисовка демонстрационных препаратов и схем репродукции вирусов.
Оформление протокола.

Г раф логической структуры темы: “МОРФОЛОГИЯ ВИРУСОВ ЧЕЛОВЕКА И БАКТЕРИОФАГОВ”

ЭУКАРИОТЫ Характерной особенностью эукариот является наличие ядра, которое способно делиться, и полового процесса. Организмы с эукариотическим типом организации условно можно разделить на два подтипа: первый характерен для простейших организмов, второй – для многоклеточных. ПРОСТЕЙШИЕ Особенностью организации простейших является то, что они (за исключением колониальных форм) соответствуют в структурном отношении уровню одной клетки, а в физиологическом – полноценной особи. Размеры простейших колеблются от 2 до 50 мк и больше. На Земле живёт свыше 25 000 видов простейших, разнообразных по своей морфологии (рис. 4) и образу жизни. Большинство из них ведёт свободный образ жизни, обитая в морях и океанах (в толще воды и на дне), а также в пресных водоемах и в почве. Более 6700 видов простейших являются паразитами. Тело простейших состоит из протоплазмы, ядра и различных включений. Протоплазма имеет ячеистое строение и в ней, даже у самых низкоорганизованных простейших, различают два слоя: внутренний – эндоплазма, в котором находится ядро и другие включения, и наружный, наружный, более плотный и прозрачный слой, – эктоплазма, который служит для передвижения, захвата пищи и защиты простейшего. Передвигаются простейшие разными способами: ползают по субстрату при помощи ложноножек, при помощи жгутиков и ресничек. Ядро простейших сходно с ядрами клеток других животных. В большинстве случаев у простейших одно ядро, но у инфузорий их два - макро- и микронуклеус. У некоторых простейших несколько ядер. Ядро может быть пузырьковидным (у амеб и многих других простейших) и массивным (макронуклеус инфузорий). Размножаются простейшие бесполым и половым путем. При бесполом размножении сначала их ядро делится на две или несколько частей, а затем цитоплазма разделяется на две (равные или неравные) или много (соответственно числу вновь образовавшихся ядер) частей. В результате из одного организма возникают два (равновеликих или неравных по величине) или несколько новых существ. При половом размножении две одинаковые или различные по величине и строению (мужская и женская) особи сливаются друг с другом в одну особь - зиготу, которая затем начинает размножаться бесполым путем. Иногда две особи данного вида простейших лишь соприкасаются друг с другом, обмениваясь частью своих ядер. Рис 5. Структурная организация инфузории туфельки: 1 – реснички, 2 – пищеварительные вакуоли, 3 – большое ядро (макронуклеус), 4 – малое ядро (микронуклеус), 5 – ротовое отверстие и глотка, 6 – непереваренные остатки пищи, выбрасываемые наружу, 7 – трихоцисты, 8 – сократительная вакуоль Простейшие гетеротрофы или автотрофы. Питаются простейшие мельчайшими животными, растительными организмами и гниющими органическими веществами; паразитические формы питаются соками своих хозяев. Пищу они переваривают в пищеварительных вакуолях - пузырьках, заполненных пищеварительным соком. Некоторые из них способны синтезировать вещества своего тела из неорганических веществ среды при помощи фотосинтеза.Дыхание простейших, т. е. поглощение кислорода из окружающей среды и выделение углекислоты, обычно осуществляется всей поверхностью тела. Многие простейшие, оказавшись в неблагоприятных условиях жизни, превращаются в цисты, при этом тело их округляется, и они покрываются толстой оболочкой. В таком состоянии простейшие могут находиться долгое время, пока не окажутся в более благоприятных для своего существования условиях. Тогда животное выходит из оболочки цисты и начинает вести подвижный образ жизни. Некоторые паразитические простейшие вызывают у человека тяжелые заболевания, характеристика некоторых из них приводится ниже. Для человека опасен малярийный плазмодий, обитающий в клетках крови человека. Он распространяется малярийными комарами и вызывает опасное заболевание – малярию. Возбудителя малярии в 1880 г. описал французский врач А. Лаверан. Малярийных паразитов комар всасывает с кровью больного человека; в организме комара плазмодии размножаются и скапливаются в слюнных железах. При укусе вместе со слюной комара в кровь человека проникают и малярийные плазмодии. Здесь они питаются, растут, размножаются, разрушают кровяные клетки человека и выделяют ядовитые вещества. При массовом выходе простейших из клеток в кровь у больного малярией начинается приступ лихорадки – повышение температуры, сильнейший озноб и слабость. Приступы повторяются через каждые два-три дня. Это ведет к малокровию, истощению организма. Другой представитель простейших – паразитическая корненожка амеба (рис. 4). Ее в 1875 г. открыл русский ученый Ф. А. Леш. Термин амёбиаз чаще всего применяется к амёбной дизентерии, однако амёбы вызывают также амёбный энцефалит, кератит и др. По данным ВОЗ около 10% людей на Земле больны амёбиазом. В основном болезнь распространена в странах с жарким климатом, однако иногда заболевание встречается в средней полосе, преимущественно в летнее время. Источником заражения является только человек, больной амёбиазом или носитель амёб. Заражение происходит фекально-оральным путем при употреблении инфицированных цистами воды и свежих овощей и зелени. Чаще всего амебиаз называю «болезнью грязных рук». Цисты могут дополнительно распространяться тараканами и мухами. В теплой влажной среде цисты паразитов способны выживать до 2-4 недель. При кишечной форме амёбиаза в верхнем отделе толстого кишечника возникает очаг воспаления, формируются язвы, иногда возникает даже некроз тканей. По кровеносным сосудам амёбы могут проникнуть в печень, формируя там вторичные очаги – абсцессы; в плевральную полость и лёгкие, перикард, брюшную полость; могут метастазировать в мозг, кожу и другие органы. Кишечник, печень, половые органы человека поражают лямблии. Они были подробно описаны отечественным ученым Д. Ф. Лямблем. У человека чаще всего паразитирует многожгутиковая лямблия (рис. 4), вызывая заболевание лямблиоз. Клетка лямблии похожа на разрезанную пополам грушу (рис. 4). Плоской стороной паразит плотно присасывается к клеткам кишечника. Лямблии существуют в подвижной и неподвижной (цисты) форме. Заражение происходит при употреблении загрязнённых цистами продуктов питания (особенно не подвергающихся термической обработке - фрукты, овощи, ягоды) и воды, а также через загрязнённые цистами руки и предметы обихода. Попав в желудочно-кишечный тракт здорового человека, лямблии размножаются в тонкой кишке, иногда в больших количествах, и вызывают раздражение слизистой оболочки. Проникая из тонкой кишки в толстую (где условия для них неблагоприятны), лямблии теряют свою подвижность и превращаются в цисты. Цисты выделяются из организма больного лямблиозом с испражнениями. Цисты хорошо сохраняются в окружающей среде: в почве способны выживать до 3 недель, а в воде - до 5 недель. Чаще болеют лямблиозом дети (особенно часто от 1 года до 4 лет). Симптоматика: боли в верхней части живота или в области пупка, вздутие живота, урчание, тошнота, запоты, сменяющиеся поносами (испражнения жёлтые с незначительным количеством слизи), дискинещии жёлчных путей, атопический дерматит, общая слабость, утомляемость, раздражительность, снижение аппетита, головные боли, плохой сон. Иногда болезнь протекает без выраженных проявлений и обнаруживается, как правило, после какого-либо другого перенесённого заболевания. Отмечается замедление нарастания веса ребенка. Токсоплазмоз - заболевание, вызываемое токсоплазмозами, источниками которых являются различные виды (свыше 180) домашних и диких млекопитающих (кошки, собаки, кролики и т.д.). Заражение человека происходит при употреблении мясных продуктов и яиц, не прошедших достаточную термическую обработку. Не исключена возможность заражения при попадании возбудителя на слизистые оболочки и повреждённые кожные покровы, трансмиссивным путём; возможно внутриутробное заражение. К факторам, которые могут способствовать появлению в организме паразита и повышают риск возникновения токсоплазмоза следует отнести: контакт с заражёнными животными; контакт в экскрементами животных; употребление в пищу или контакт с сырым или не до конца приготовленным мясом, особенно свинины, мяса ягнёнка или оленины; пересадка органов или переливание крови (очень редко); наличие токсоплазмоза у родителей. При врождённом токсоплазмозе наблюдаются гибель плода в утробе матери, смерть новорождённого в результате общей инфекции или (у оставшихся в живых) поражение нервной системы, глаз и других органов. Острая приобретённая форма протекает как тифоподобное заболевание (с высокой температурой, увеличением печени, селезёнки) либо с преимущественным поражением нервной системы (головная боль, судороги, рвота, параличи и др.). Чаще токсоплазмоз протекает хронически, с субфебрильной температурой, головной болью, увеличением лимфоузлов и печени, понижением работоспособности; может сопровождаться поражением глаз, сердца, нервной и др. систем и органов. Токсоплазмоз может протекать и в латентной (скрытой) форме. Исследования показали, что при поражении иммунной системы и мозга человека паразит может вызвать влечение к запаху кошки и шизофрению. Трихомониаз - инфекционное заболевание, передаваемое половым путем, вызывается одноклеточным микроорганизмом – трихомонадой. Трихомониаз занимает первое место по распространенности среди заболеваний мочеполового тракта и заболеваний, передающихся половым путём.Опасность данного заболевания заключается в том, что в 70 - 80% заболеваний среди мужчин являются бессимптомными формами и проявляются лишь на стадии появления осложнений. У женщин заболевание, как правило, проявляет себя в первые 1 – 4 недели. Трихомониаз опасен в первую очередь тяжелыми последствиями в виде осложнений, которые могут быть причиной бесплодия. Недуг может быть выявлен у женщины и при беременности - он сказывается не только на росте, но и на развитии плода. Также урогенитальный трихомониаз может вызвать выкидыш, преждевременные роды либо осложнения самой беременности.

Простейшие представлены одноклеточными организмами, тело которых состоит из цитоплазмы и одного или нескольких ядер. Клетка простейшего - это самостоятельная особь, проявляющая все основные свойства живой материи. Она выполняет функции всего организма, тогда как клетки многоклеточных составляют лишь часть организма, каждая клетка зависит от многих других.

Принято считать, что одноклеточные существа более примитивны, нежели многоклеточные. Однако, поскольку все тело одноклеточных по определению состоит из одной клетки, эта клетка должна уметь делать все: и питаться, и двигаться, и нападать, и спасаться от врагов, и переживать неблагоприятные условия среды, и размножаться, и избавляться от продуктов обмена, и защищаться от высыхания и от чрезмерного проникновения воды внутрь клетки.

Многоклеточный организм тоже все это умеет, но каждая его клетка, взятая в отдельности, хорошо умеет делать только что-нибудь одно. В этом смысле клетка простейшего - отнюдь не примитивнее клетки многоклеточного организма.

Большинство представителей класса имеет микроскопические размеры - 3-150 мкм. Только наиболее крупные представители вида (раковинные корненожки) достигают 2-3 см в диаметре.

Строение тела простейшего типично для эукариотической клетки. Имеются органеллы общего (митохондрии, рибосомы, клеточный центр, ЭПС и др.) и специального назначения. К последним относятся органы движения: ложноножки, или псевдоподии (временные выросты цитоплазмы), жгутики, реснички, пищеварительные и сократительные вакуоли. Органоиды общего значения присущи всем эукариотическим клеткам.

Органоиды пищеварения - пищеварительные вакуоли с пищеварительными ферментами (сходны по происхождению с лизосомами). Питание происходит путем пино- или фагоцитоза. Непереваренные остатки выбрасываются наружу. Некоторые простейшие имеют хлоропласты и питаются за счет фотосинтеза.

Пресноводные простейшие имеют органы осморегуляции - сократительные вакуоли, которые периодически выделяют во внешнюю среду излишки жидкости и продукты диссимиляции.

Большинство простейших имеет одно ядро, но есть представители с несколькими ядрами. Ядра некоторых простейших характеризуются полиплоидностью.

Цитоплазма неоднородна. Она подразделяется на более светлый и гомогенный наружный слой, или эктоплазму, и зернистый внутренний слой, или эндоплазму. Наружные покровы представлены либо цитоплазматической мембраной (у амебы), либо пелликулой (у эвглены). Фораминиферы и солнечники, обитатели моря, имеют минеральную, или органическую, раковину.

Особенности жизнедеятельности простейших

Дыхание, т. е. газообмен, происходит через всю поверхность клетки.

Раздражимость представлена таксисами (двигательными реакциями). Встречаются фототаксис, хемотаксис и др.

Размножение простейших

Бесполое - митозом ядра и делением клетки надвое (у амебы, эвглены, инфузории), а также путем шизогонии - многократного деления (у споровиков).

Половое - копуляция. Клетка простейшего становится функциональной гаметой; в результате слияния гамет образуется зигота.

Для инфузорий характерен половой процесс - конъюгация. Он заключается в том, что клетки обмениваются генетической информацией, но увеличения числа особей не происходит.

Многие простейшие способны существовать в двух формах - трофозоита (вегетативной формы, способной к активному питанию и передвижению) и цисты, которая образуется при неблагоприятных условиях. Клетка обездвиживается, обезвоживается, покрывается плотной оболочкой, обмен веществ резко замедляется. В такой форме простейшие легко переносятся на большие расстояния животными, ветром и расселяются. При попадании в благоприятные условия обитания происходит эксцистирование, клетка начинает функционировать в состоянии трофозоита. Таким образом, инцистирование не является способом размножения, но помогает клетке переживать неблагоприятные условия среды.

Для многих представителей типа Protozoa характерно наличие жизненного цикла, состоящего в закономерном чередовании жизненных форм. Как правило, происходит смена поколений с бесполым и половым размножением. Образование цисты не является частью закономерного жизненного цикла.

Время генерации для простейших составляет 6-24 ч. Это означает, что, попав в организм хозяина, клетки начинают размножаться по экспоненте и теоретически могут привести его к гибели. Однако этого не происходит, так как вступают в силу защитные механизмы организма хозяина.

Медицинское значение имеют представители простейших, относящиеся к классам саркодовые, жгутиковые, инфузории и споровики.

Классификация простейших . По классификации М.В.Крылова (1996 г.) простейшие выделены в отдельное царство Protista, включающее 7 типов. Простейшие, обитающие в организме человека, относятся к следующим классам: Entamoebidea (дизентерийная амеба), Kinetoplastidea (лейшмании, трипаносомы), Diplomonadea (лямблии), Parabasalea (трихомонады), Coccidea (плазмодии малярии, токсоплазмы, кокцидии), Rimostomatea (балантидии).

Протозойные болезни человека являются глобальной проблемой, так как встречаются практически повсеместно. Значительное распространение в странах с жарким климатом имеют амебиаз, трипаносомоз, лямблиоз. Наибольший ущерб наносит малярия.

Биология некоторых простейших

Дизентерийная амеба . Многие виды амеб обитают в организме животных и человека (род Entamoeba), однако имеется только один вид - дизентерийная амеба - Entamoeba histolytica, который может быть возбудителем тяжелой формы кишечного колита – амебиаза.

Амеба эта имеет 20-30 мкм в диаметре, передвигается, изменяя форму тела и образуя кратковременные выросты - псевдоподии, или ложноножки. Размножение бесполое, путем деления. Живет в толстых кишках человека и обычно питается бактериями, не нанося никакого вреда (носительство). Но в ряде случаев дизентерийная амеба начинает вести себя иначе: проникает под слизистую оболочку кишки, начинает там питаться эритроцитами и другими клеточными элементами хозяина и усиленно размножаться. Слизистая кишечника изъязвляется, результатом чего бывает тяжелый кровавый понос (колит).

Распространение кишечных амеб осуществляется при помощи цист, выходящих вместе с фекальными массами наружу. Цисты очень стойки и длительное время сохраняют жизнеспособность и инвазионность (способность к заражению при попадании в кишечник человека). По строению цист можно установить диагноз вида амебы. Кишечная амеба имеет восьмиядерные цисты, тогда как дизентерийная - четырехядерные.

Лямблии . Лямблии (Lamblia intestinalis) существуют в виде вегетативной формы (трофозоит) и способны образовывать цисты. Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидной формы. Передний конец тела закруглен, задний - заострен. Длина 9-18 мкм. Имеется два ядра, 4 пары жгутиков. Пищу всасывают всей поверхностью тела. Размножаются путем продольного деления.

Лямблии обитают в верхнем отделе тонкого кишечника, попадая в нижние отделы кишечника, где условия для них неблагоприятные, превращаются в цисты, которые и выделяются обычно с испражнениями.

Цисты хорошо сохраняются в окружающей среде, в зависимости от температуры воздуха - до месяца. Заражение может произойти через загрязненные руки, игрушки, пищу и воду. Цисты, попадая в кишечник, превращаются там в вегетативные формы.

Заболевание вызываемое лямблиями называется лямблиоз.

Трихомонада мочеполовая (влагалищная). В организме человека обитает в мочеполовых путях Trichomonas vaginalis мочеполовая (влагалищная) трихомонада.

Размеры 20-36 мкм. На переднем конце расположены 4 жгутика, отходящих от базальных зерен и ундулирующая мембрана. Через всю цитоплазму, от области базальных зерен до конца клетки, проходит опорная эластичная нить (аксостиль). У основания имеется щелевидное углубление, через которое происходит захват пищи (бактерий) посредством фагоцитоза, возможно осмотическое питание. Трихомонады - подвижные организмы. Стадия цисты отсутствует.

Плазмодии малярии. Плазмодии, вызывающие у человека малярию, относятся к четырем видам:

Plasmodium vivax - возбудитель трехдневной малярии;

Plasmodium malariae - возбудитель четырехдневной малярии;

Plasmodium falciparum - возбудитель тропической малярии и

Plasmodium ovale - возбудитель малярии, типа трехдневной (овале).

При кровососании зараженный малярийный комар вместе со слюной вводит в ранку спорозоиты - веретенообразные, чуть изогнутые образования длиной 11 - 15 мкм. С кровью они попадают в клетки печени, где развиваются и делятся (тканевая, или экзоэритроцитарная, шизогония).

После нескольких циклов бесполого размножения (шизогонии) начинается подготовка к половому процессу, образование гамонтов.

Дальнейшего развития гамонтов в крови человека не происходит. Оно осуществляется лишь в том случае, если кровь с ними попадает в кишечник малярийного комара при сосании.

Малярийные плазмодии вызывают у человека тяжелое заболевание - малярию.

Токсоплазмы поражают многих диких и домашних животных и птиц, а также человека, в организме которых проходят бесполый цикл развития и размножения (промежуточные хозяева).

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ О ВЕТЕРИНАРНОЙ ПРОТОЗООЛОГИИ

Разнообразна их биология. Простейшие быть строго специфичными возбудителями болезней, так и использовать для своего развития животных нескольких видов. Последние играют роль дефинитивных и промежуточных хозяев, механических и биологических переносчиков. Ветеринарную протозоологию условно можно разделить по морфофизиологическим особенностям простейших на разделы, охватывающие болезни, которые вызываются различными возбудителями. Это, например, болезни, вызываемые споровиками, жгутиковыми, ресничными и другими простейшими.

Систематика простейших . До последнего времени считалось, что подцарство Protozoa представляет лишь один тип животного мира. В настоящее время по предложению Международного комитета по систематике простейших подцарство Protozoa разделено на семь отдельных типов:

1. Sarcomastigophora (амебы и жгутиконосцы) - простейшие, которые передвигаются с помощью ложноножек или жгутиков. С их помощью они захватывают и поглощают пищу.

2. Labirinthomorpha - встречаются редко, преимущественно на гниющих водорослях.

3. Apicomplexa - на переднем конце тела клетки или стадии ее развития расположен специфический комплекс органелл.

6. Myxozoa - также изучен недостаточно полно. Известно, что оболочки спор могут состоять из 1-6 жестких створок. При этом в едином морфологическом образовании может находиться до 6 полярных капсул, содержащих полярную нить и различное количество двухъядерных инвазионных зародышей.

7. Ciliophora (инфузории) - сравнительно крупные организмы, длиной от 50 до 300 мкм и более. Тело покрыто ресничками (для движения и захвата пищи). Имеют два типа ядер - вегетативное (макронуклеус) и генеративное (микронуклеус). Макронуклеус характеризуется клеточным метаболизмом, он крупнее микронуклеуса и может быть разной формы. Микронуклеусов в клетке может быть несколько, они мелкие и круглые (носитель генетической информации).

Тело простейших покрыто клеточной или плазматической мембраной. Снаружи к плазматической мембране прилегает мукоидный слой из полисахаридов. Он связан с информационной системой клетки. С помощью этого слоя в клетках могут накапливаться вещества из окружающей среды, поглощаемые клеткой.

Пространство, ограниченное плазматической мембраной, заполняет цитоплазма, в которой находится ядро.

Цитоплазма разделена на поверхностный слой - эктоплазму и внутренний- эндоплазму. В цитоплазме имеется целый ряд органелл: рибосомы, лизосомы, митохондрии, цитоплазматическая сеть, пластинчатый комплекс (аппарат Гольджи). Они выполняют функции, присущие организмам клеток макроорганизма.

Ядра простейших имеют разнообразные форму и размеры. Нередко у простейших может встречаться несколько ядер одного или двух типов - генеративных микронуклеусов и соматических – макронуклеусов.

Движение простейших происходит или с помощью ресничек и жгутиков, или за счет псевдоподий. У многих жгутиковых имеется ундулирующая мембрана, у трихомонад для движения аксостиль - органоид из микротрубочек, тесно прилегающих друг к другу. У некоторых жгутиковых имеется тонкая валикообразная перепонка (складка протоплазмы). Движение с помощью псевдоподий осуществляется за счет перемещения цитоплазмы внутри клетки. Некоторые инфузории способны передвигаться за счет сокращения и изгибания тела. Перемещение путем скольжения (спорозоиты эймерий). Внутриклеточные споровики продвигаются и проникают в клетку с помощью расположенного у них на переднем конце апикального комплекса, имеющего сложное строение.

Пища переваривается в эндоплазме, после чего питательные компоненты распределяются по клетке. Здесь же располагается и экскреторный аппарат, с помощью которого удаляются продукты обмена (сократительные вакуоли, связанные с канальцами эндоплазматической сети). Вакуоли опорожняют свое содержимое через специальную пору. Экскреторные органоиды могут иметь другой вид, могут отсутствовать - тогда экскреция осуществляются через поверхность тела.

Дыхание у простейших может быть аэробным и анаэробным.

Среди простейших распространен процесс инцистирования - способность при неблагоприятных условиях образовывать цисту. Она окружена внеклеточной оболочкой, внутри которой клетки могут сохраняться годами в пассивном состоянии. При попадании цисты в оптимальные условия происходит его эксцистирование и возбудитель становится способным к воспроизводству. У некоторых Protozoa (кокцидии), инцистирование - необходимое звено цикла развития.

Размножение простейших бесполое и половое, всегда сопровождается делением ядра. Бесполое, или агамное, размножение: ядро, а затем протоплазма расщепляются на два образования, каждое из которых получает часть ядра и протоплазмы. В некоторых случаях от материнской клетки может отделиться дочерняя особь более мелких размеров. Такое деление называется почкованием. Присуще простейшим и множественное деление, когда вначале многократно делится ядро, вокруг вновь образовавшихся ядер формируются протоплазма и органеллы. Процесс заканчивается делением материнской клетки на такое количество дочерних клеток, сколько было ядер. Многоядерные образования, не дифференцированные в половом отношении, называются меронтами, а дочерние клетки в этом случае - мерозоитами. Если образуются мужские и женские клетки, то многоядерные клетки называют гамонтами, а сам процесс - гаметогонией.

В результате деления гамонтов образуются гаметы: мужские - микрогаметы и женские - макрогаметы. Если множественное деление наступает после полового процесса, то образовавшиеся многоядерные клетки называют споронтами, дочерние - спорозоитами, а сам процесс - спорогонией.

При половом размножении оплодотворение может происходить путем копуляции или конъюгации. В первом случае сливаются две половые клетки (гаметы), во втором - две особи простейших временно соединяются друг с другом, их макронуклеусы растворяются, происходит обмен ядерным веществом микронуклеусов. После этого конъюгировавшие особи расходятся и в дальнейшем делятся бесполым путем.

Эпизоотология протозойных болезней . Протозойные болезни распространены практически повсеместно. Возникают в любое время года и поражают все возрастные группы животных. Свойствен определенный ареал распространения, что обусловлено особенностями звеньев эпизоотической цепи. Для возникновения заболевания должно быть min два звена больное и восприимчивое животное. При непосредственном контакте происходит перезаражение, развивается болезнь. Болезни, развивающиеся по такой схеме: случная болезнь однокопытных и трихомоноз КРС.

Чаще развитие болезни идет с участием трех звеньев эпизоотической цепи, где первым является больное животное, вторым может быть внешняя среда, где возбудитель развивается и становится инвазионным, и третье звено - восприимчивое животное. Примеры развития болезни по этой схеме эймериозы животных, изоспорозы и др.

Многие протозойные болезни передаются с помощью переносчиков - членистоногих, и поэтому их называют трансмиссивными. Их развитие идет также с участием трех звеньев эпизоотической цепи. Первым звеном является больное животное. Вторым звеном выступает переносчик - насекомые, клещи и третье звено - это восприимчивые животные.

Для целого ряда протозоозов - трансмиссивных болезней - характерно то, что их очаги существуют в природе длительное время. Это бывает обусловлено наличием в очаге доноров, которыми могут быть дикие животные, переносчиков, которые находят для себя в очаге оптимальные условия существования, и реципиентов - сельскохозяйственных животных и человека, живущих в очаге.

Академик Е. Н. Павловский назвал очаги таких болезней природными, а сами болезни - природно-очаговыми. Таким образом, природная очаговость трансмиссивных болезней - сосуществование в течение длительного времени в природных условиях возбудителя, его переносчика и восприимчивых животных в течение смены своих поколений. Природный очаг болезни может существовать только в определенных почвенно-климатических условиях, где постоянно имеются доноры, переносчики и реципиенты возбудителя. К природно-очаговым болезням можно отнести пироплазмидозы животных, лейшманиозы плотоядных и др.

Для ветеринарного врача важно знать все звенья эпизоотической цепи, развитие эпизоотического процесса при постановке диагноза при протозоозах. Эти знания нужны и при разработке мероприятий по профилактике и ликвидации этих болезней в хозяйствах, отдельных местностях или целых природно-климатических зонах.

ПИРОПЛАЗМОЗЫ ЖИВОТНЫХ

(от греч. proto — начало, zoa — животное), микроскопические одноклеточные животные.

Многие из них — возбудители тяжелых заболеваний человека и животных. Размеры простейших сильно варьируют: величина малярийного плазмодия 2—5 мкм, а балантидия 60—80 мкм. Структура клетки простейшего сходна со структурой клетки всех животных. Простейшие покрыты мягкой, гибкой и хрупкой внешней оболочкой — плазмолеммой, по структуре сходной с цитоплазматической мембраной бактерий. В цитоплазме имеется развитая эндоплазматическая сеть, которая делит ее на отсеки. Мембраны этой сети участвуют в образовании различных структур и органелл клетки, таких, как ядро, лизосомы, митохондрии, диктиосомы или тельца Гольджи, различные вакуоли (пищеварительные, сократительные).

Ядро простейших, чаще одиночное, содержит основное количество ДНК. Оно окружено оболочкой, состоящей из двух элементарных мембран, причем наружная переходит непосредственно в эндоплазматическую сеть. В ядерной оболочке имеются поры размером до 10 нм.

Лизосомы — сферические структуры диаметром около 0,5 мкм, окруженные мембраной. Они содержат ряд гидролитических ферментов и участвуют в процессах переваривания различных веществ.

Митохондрии являются фабриками клеточного дыхания. Эти органеллы окружены двойной мембраной: внутренняя образует выпячивания — кристы. В митохондриях имеются ферменты, которые участвуют в процессах биологического окисления, обеспечивая клетку энергией. В митохондриях обнаружена ДНК. Диктиосомы синтезируют материал клеточной стенки. Рибосомы, участвующие в синтезе белка, располагаются по периферии эндоплазматической сети.

Тип простейших — Protozoa — делится на 4 класса: Sarcodina, Flagellata, Sporozoa, Ciliata. Среди них имеются возбудители заболеваний — патогенные простейшие.

Класс Sarcodina (саркодовые) . Представители этого класса — амебы — передвигаются с помощью псевдоподий, или ложноножек, и представляют собой кусочек цитоплазмы, покрытый очень тонкой и податливой оболочкой (рис. 17,1—3,6). Цитоплазма амебы состоит из более плотного наружного слоя — прозрачной эктоплазмы и внутренней мелкогранулированной эндоплазмы. В цитоплазме расположены ядро с ядрышком внутри, пищеварительные и выделительные вакуоли, гранулы запасных питательных веществ. В неблагоприятных условиях амебы образуют цисты, очень устойчивые к вредным воздействиям (рис. 17,3—5, 7, 8). Амебы размножаются делением. Дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica) вызывает у человека амебную дизентерию, или амебиаз.

Трихомонады. В организме человека обитают кишечные и влагалищные трихомонады (рис. 17,9—11). Патогенность ротовой трихомонады не установлена. Большое количество трихомонад в ротовой полости свидетельствует о плохом гигиеническом состоянии ее. Влагалищная трихомонада вызывает заболевания женских половых органов. Роль кишечной трихомонады в развитии кишечных заболеваний не установлена.

Лямблии находятся у человека в двенадцатиперстной кишке и при большом количестве могут нарушать процесс всасывания питательных веществ слизистой оболочкой кишечника (рис. 17, 12—13).

Лейшмании вызывают тяжелые заболевания человека: висцеральный и кожный лейшманиоз. В организме человека они образуют мелкие овальные лейшманиальные формы, в цитоплазме которых содержатся ядро, кинетопласт и остатки жгутика. В организме переносчика — москита-флеботомуса и при выращивании на искусственных питательных средах лейшмании образуют лептомонадные формы: подвижные, с вытянутым телом и жгутиком на переднем конце.

Трипаносоми вызывают тяжелые заболевания человека: сонную болезнь в Африке и болезнь Чагаса в Южной Америке. Имеют крупное веретенообразное тело и кинетопласт в заднем конце его. Вдоль всей поверхности тела проходит волнообразная, или ундулирующая, мембрана, заканчивающаяся жгутиком на переднем конце.

Класс Ciliata (реснитчатые) . Типичным представителем его является Balantidium coli, вызывающий у человека балантидиаз. Имеет овальную форму, покрыт упругой твердой хитиновой оболочкой. Активно передвигается с помощью ресничек, покрывающих все тело балантидия. На одном конце находится рот, ведущий в «глотку» типа воронки, куда пища заносится ресничками, расположенными вокруг рта. Процесс пищеварения происходит в пищеварительных вакуолях. Жидкие продукты обмена собираются в сократительных вакуолях и выводятся наружу. Непереваренные остатки выбрасываются через анальную пору. Балантидии размножаются бесполым путем (простое деление) и половым — конъюгацией (рис. 17, 14—16). В неблагоприятных условиях балантидии образуют цисты.